halaman_banner

Pemahaman Baru tentang Terapi Platelet Rich Plasma (PRP) – Bagian II

PRP Modern: “PRP Klinis”

Dalam 10 tahun terakhir, skema pengobatan PRP telah mengalami perubahan besar.Melalui penelitian eksperimental dan klinis, kami kini memiliki pemahaman yang lebih baik tentang trombosit dan fisiologi sel lainnya.Selain itu, beberapa evaluasi sistematis berkualitas tinggi, meta-analisis dan uji coba terkontrol secara acak telah menunjukkan efektivitas bioteknologi PRP di banyak bidang medis, termasuk dermatologi, bedah jantung, bedah plastik, bedah ortopedi, manajemen nyeri, penyakit tulang belakang, dan kedokteran olahraga. .

Karakteristik PRP saat ini adalah konsentrasi trombosit absolutnya, yang berubah dari definisi awal PRP (termasuk konsentrasi trombosit yang lebih tinggi dari nilai dasar) menjadi lebih dari 1 × 10 6/µ L atau sekitar 5 kali konsentrasi trombosit minimum dalam trombosit dari garis dasar.Dalam tinjauan ekstensif oleh Fadadu et al.33 sistem dan protokol PRP dievaluasi.Jumlah trombosit pada sediaan akhir PRP yang dihasilkan oleh beberapa sistem ini lebih rendah dibandingkan darah utuh.Mereka melaporkan bahwa faktor trombosit PRP meningkat hingga 0,52 dengan spin kit tunggal (Selphyl ®).Sebaliknya, EmCyte Genesis PurePRPII ® rotasi ganda Konsentrasi trombosit yang dihasilkan oleh perangkat ini adalah yang tertinggi (1,6 × 10 6 /µL) .

Jelasnya, metode in vitro dan hewan bukanlah lingkungan penelitian yang ideal untuk keberhasilan transformasi ke dalam praktik klinis.Demikian pula studi perbandingan alat tidak mendukung keputusan tersebut, karena menunjukkan bahwa konsentrasi trombosit antar alat PRP sangat berbeda.Untungnya, melalui teknologi dan analisis berbasis proteomik, kita dapat meningkatkan pemahaman kita tentang fungsi sel pada PRP yang mempengaruhi hasil pengobatan.Sebelum mencapai konsensus mengenai persiapan dan formulasi PRP terstandar, PRP harus mengikuti formulasi PRP klinis untuk mendorong mekanisme perbaikan jaringan yang substansial dan hasil klinis yang progresif.

 

Rumus PRP klinis

Saat ini, PRP klinis yang efektif (C-PRP) telah ditandai sebagai komposisi kompleks komponen multiseluler autologus dalam plasma volume kecil yang diperoleh dari sebagian darah tepi setelah sentrifugasi.Setelah sentrifugasi, PRP dan komponen sel non-trombositnya dapat diperoleh kembali dari perangkat konsentrasi sesuai dengan kepadatan sel yang berbeda (yang kepadatan trombositnya paling rendah).

Klinik-PRP

Gunakan peralatan pemisahan kepadatan sel PurePRP-SP ® (EmCyte Corporation, Fort Myers, FL, USA) yang digunakan untuk darah utuh setelah dua prosedur sentrifugasi.Setelah proses sentrifugasi pertama, komponen darah utuh dipisahkan menjadi dua lapisan dasar, suspensi plasma trombosit (lean) dan lapisan sel darah merah.Di A, langkah sentrifugasi kedua telah selesai.Volume PRP sebenarnya dapat diekstraksi untuk aplikasi pasien.Pembesaran di B menunjukkan adanya lapisan coklat sedimentasi eritrosit multi-komponen yang terorganisir (diwakili oleh garis biru) di bagian bawah peralatan, yang mengandung trombosit, monosit, dan limfosit konsentrasi tinggi, berdasarkan gradien kepadatan.Dalam contoh ini, menurut protokol persiapan C-PRP dengan neutrofil yang buruk, persentase minimum neutrofil (<0,3%) dan eritrosit (<0,1%) akan diekstraksi.

 

Butiran trombosit

Pada penerapan PRP klinis awal, α- Granules adalah struktur internal trombosit yang paling sering disebutkan, karena mengandung faktor koagulasi, sejumlah besar PDGF dan regulator angiogenik, namun memiliki sedikit fungsi trombogenik.Faktor lain termasuk komponen kemokin dan sitokin yang kurang dikenal, seperti faktor trombosit 4 (PF4), protein dasar pra-trombosit, P-selectin (penggerak integrin) dan kemokin RANTES (diatur melalui aktivasi, mengekspresikan sel T normal dan mungkin mensekresi).Fungsi keseluruhan komponen butiran trombosit spesifik ini adalah untuk merekrut dan mengaktifkan sel imun lain atau menginduksi peradangan sel endotel.

Butiran trombosit

 

Komponen granular padat seperti ADP, serotonin, polifosfat, histamin dan adrenalin lebih implisit digunakan sebagai pengatur aktivasi trombosit dan trombosis.Yang terpenting, banyak dari elemen ini memiliki fungsi memodifikasi sel kekebalan.ADP trombosit dikenali oleh reseptor P2Y12ADP pada sel dendritik (DC), sehingga meningkatkan endositosis antigen.DC (antigen presenting cell) sangat penting untuk menginisiasi respon imun sel T dan mengendalikan respon imun protektif, yang menghubungkan sistem imun bawaan dan sistem imun adaptif.Selain itu, trombosit adenosin trifosfat (ATP) mengirimkan sinyal melalui reseptor sel T P2X7, menyebabkan peningkatan diferensiasi sel T helper CD4 menjadi sel T helper 17 (Th17) proinflamasi.Komponen granul padat trombosit lainnya (seperti glutamat dan serotonin) masing-masing menginduksi migrasi sel T dan meningkatkan diferensiasi monosit menjadi DC.Dalam PRP, imunomodulator yang berasal dari partikel padat ini sangat diperkaya dan memiliki fungsi kekebalan yang besar.

Jumlah interaksi potensial langsung dan tidak langsung antara trombosit dan sel (reseptor) lainnya sangat banyak.Oleh karena itu, penerapan PRP pada lingkungan jaringan patologis lokal dapat menyebabkan berbagai efek inflamasi.

 

Konsentrasi trombosit

C-PRP harus mengandung dosis klinis trombosit pekat untuk menghasilkan efek terapeutik yang bermanfaat.Trombosit dalam C-PRP harus merangsang proliferasi sel, sintesis faktor mesenkim dan neurotropik, mendorong migrasi sel kemotaktik dan merangsang aktivitas imunoregulasi, seperti yang ditunjukkan pada gambar.Konsentrasi trombosit

 

Trombosit yang teraktivasi, pelepasan PGF dan molekul adhesi memediasi berbagai interaksi sel: kemotaksis, adhesi sel, migrasi, dan diferensiasi sel, serta mengatur aktivitas regulasi imun.Interaksi sel-sel trombosit ini berkontribusi terhadap angiogenesis dan aktivitas inflamasi, dan pada akhirnya merangsang proses perbaikan jaringan.Singkatan: BMA: aspirasi sumsum tulang, EPC: sel progenitor endotel, EC: sel endotel, 5-HT: 5-hydroxytryptamine, RANTES: regulasi teraktivasi dari ekspresi sel T normal dan sekresi diduga, JAM: tipe molekul adhesi persimpangan, CD40L: cluster 40 ligan, SDF-1 α: Faktor turunan sel stroma-1 α, CXCL: ligan kemokin (motif CXC), PF4: faktor trombosit 4. Diadaptasi dari Everts dkk.

Marx adalah orang pertama yang membuktikan bahwa penyembuhan tulang dan jaringan lunak ditingkatkan, dan jumlah trombosit minimum adalah 1 × 10 6 /µL。 Hasil ini dikonfirmasi dalam penelitian fusi lumbal melalui foramen intervertebralis, ketika dosis trombosit lebih besar dari 1,3 × Pada 106 trombosit/µ L, penelitian ini menunjukkan lebih banyak fusi.Selain itu, Giusti dkk.Terungkap 1,5 × Mekanisme perbaikan jaringan pada dosis 109 membutuhkan trombosit/mL untuk menginduksi angiogenesis fungsional melalui aktivitas sel endotel.Dalam penelitian terakhir, konsentrasi yang lebih tinggi mengurangi potensi angiogenesis trombosit di dalam dan sekitar folikel.Selain itu, data sebelumnya menunjukkan bahwa dosis PRP juga akan mempengaruhi hasil pengobatan.Oleh karena itu, untuk menginduksi reaksi angiogenesis secara signifikan dan merangsang proliferasi sel dan migrasi sel, C-PRP harus mengandung setidaknya 7,5 dalam botol perawatan PRP 5 mL × 10 9 yang dapat menghasilkan trombosit.

Selain ketergantungan dosis, efek PRP pada aktivitas sel tampaknya sangat bergantung pada waktu.Sophie dkk.Hasil ini menunjukkan bahwa paparan jangka pendek terhadap lisat trombosit manusia dapat merangsang proliferasi sel tulang dan kemotaksis.Sebaliknya, paparan PRP dalam jangka panjang akan menurunkan kadar alkali fosfatase dan pembentukan mineral.

 

sel darah merah

Sel darah merah bertanggung jawab untuk mengangkut oksigen ke jaringan dan mentransfer karbon dioksida dari jaringan ke paru-paru.Mereka tidak memiliki inti dan terdiri dari molekul heme yang berikatan dengan protein.Komponen zat besi dan heme dalam sel darah merah mendorong kombinasi oksigen dan karbon dioksida.Umumnya siklus hidup sel darah merah adalah sekitar 120 hari.Mereka dikeluarkan dari sirkulasi oleh makrofag melalui proses yang disebut penuaan sel darah merah.Sel darah merah dalam sampel PRP mungkin rusak akibat kondisi geser (misalnya, operasi pendarahan seluruh darah, proses yang dimediasi kekebalan, stres oksidatif, atau skema konsentrasi PRP yang tidak memadai).Oleh karena itu, membran sel RBC terurai dan melepaskan hemoglobin toksik (Hb), diukur dengan hemoglobin bebas plasma (PFH), heme dan zat besi.].PFH dan produk degradasinya (heme dan besi) bersama-sama menyebabkan efek berbahaya dan sitotoksik pada jaringan, menyebabkan stres oksidatif, hilangnya oksida nitrat, aktivasi jalur inflamasi dan imunosupresi.Efek ini pada akhirnya akan menyebabkan disfungsi mikrosirkulasi, vasokonstriksi lokal dan cedera pembuluh darah, serta kerusakan jaringan yang serius.

Yang terpenting adalah ketika sel darah merah yang mengandung C-PRP dikirimkan ke jaringan, akan menimbulkan reaksi lokal yang disebut eryptosis, yang akan memicu pelepasan sitokin dan penghambat migrasi makrofag yang efektif.Sitokin ini menghambat migrasi monosit dan makrofag.Ini memberikan sinyal pro-inflamasi yang kuat ke jaringan sekitarnya, menghambat migrasi sel induk dan proliferasi fibroblas, dan menyebabkan disfungsi sel lokal yang signifikan.Oleh karena itu, penting untuk membatasi kontaminasi sel darah merah pada sediaan PRP.Selain itu, peran sel darah merah dalam regenerasi jaringan belum pernah diketahui.Proses sentrifugasi dan persiapan C-PRP yang memadai biasanya akan mengurangi atau bahkan menghilangkan keberadaan sel darah merah, sehingga menghindari dampak buruk hemolisis dan polisitemia.

 

Leukosit pada C-PRP

Adanya sel darah putih pada sediaan PRP bergantung pada peralatan pengobatan dan skema sediaan.Dalam peralatan PRP berbasis plasma, sel darah putih dihilangkan seluruhnya;Namun, sel darah putih terkonsentrasi secara signifikan pada sediaan PRP lapisan coklat sedimentasi eritrosit.Karena mekanisme pertahanan kekebalan dan inangnya, sel darah putih sangat mempengaruhi biologi internal kondisi jaringan akut dan kronis.Fitur-fitur ini akan dibahas lebih lanjut di bawah.Oleh karena itu, keberadaan leukosit spesifik pada C-PRP dapat menyebabkan efek seluler dan jaringan yang signifikan.Lebih khusus lagi, sistem sedimentasi eritrosit PRP lapisan coklat-kuning yang berbeda menggunakan skema persiapan yang berbeda, sehingga menghasilkan proporsi neutrofil, limfosit dan monosit yang berbeda dalam PRP.Eosinofil dan basofil tidak dapat diukur dalam sediaan PRP karena membran selnya terlalu rapuh untuk menahan gaya pemrosesan sentrifugal.

 

Neutrofil

Neutrofil adalah leukosit penting dalam banyak jalur penyembuhan.Jalur ini bergabung dengan protein antimikroba yang terdapat dalam trombosit untuk membentuk penghalang padat terhadap patogen invasif.Keberadaan neutrofil ditentukan berdasarkan target pengobatan C-PRP.Peningkatan tingkat peradangan jaringan mungkin diperlukan dalam bioterapi PRP perawatan luka kronis atau dalam aplikasi yang ditujukan untuk pertumbuhan atau penyembuhan tulang.Yang penting, fungsi neutrofil tambahan telah ditemukan di beberapa model, menekankan peran mereka dalam angiogenesis dan perbaikan jaringan.Namun, neutrofil juga dapat menimbulkan efek berbahaya, sehingga tidak cocok untuk beberapa aplikasi.Zhou dan Wang membuktikan bahwa penggunaan PRP yang kaya neutrofil dapat menyebabkan peningkatan rasio kolagen tipe III terhadap kolagen tipe I, sehingga memperburuk fibrosis dan mengurangi kekuatan tendon.Karakteristik berbahaya lainnya yang dimediasi oleh neutrofil adalah pelepasan sitokin inflamasi dan matriks metalloproteinase (MMPs), yang dapat meningkatkan peradangan dan katabolisme ketika diterapkan pada jaringan.

 

Leukomonosit

Pada C-PRP, limfosit T dan B mononuklear lebih terkonsentrasi dibandingkan sel darah putih lainnya.Mereka berkaitan erat dengan imunitas adaptif sitotoksik yang diperantarai sel.Limfosit dapat memicu reaksi sel untuk melawan infeksi dan beradaptasi dengan penyerang.Selain itu, sitokin turunan limfosit T (interferon- γ [IFN- γ] dan interleukin-4 (IL-4) meningkatkan polarisasi makrofag. Verassar et al. Terbukti bahwa limfosit T konvensional secara tidak langsung dapat meningkatkan penyembuhan jaringan di model tikus dengan mengatur diferensiasi monosit dan makrofag.

 

Monosit – sel perbaikan multipoten

Berdasarkan alat penyiapan PRP yang digunakan, monosit mungkin menonjol atau tidak ada pada botol perawatan PRP.Sayangnya performa dan kemampuan regenerasinya jarang dibahas dalam literatur.Oleh karena itu, sedikit perhatian diberikan pada monosit dalam metode persiapan atau formula akhir.Kelompok monosit bersifat heterogen, berasal dari sel progenitor di sumsum tulang, dan diangkut ke jaringan perifer melalui jalur sel induk hematopoietik sesuai dengan stimulasi lingkungan mikro.Selama homeostasis dan peradangan, monosit yang bersirkulasi meninggalkan aliran darah dan direkrut ke jaringan yang terluka atau terdegradasi.Mereka dapat bertindak sebagai makrofag (M Φ) sel efektor atau sel progenitor.Monosit, makrofag, dan sel dendritik mewakili sistem fagositik mononuklear (MPS). Ciri khas MPS adalah plastisitas pola ekspresi gennya dan tumpang tindih fungsional antara tipe sel ini.Pada jaringan yang mengalami degenerasi, makrofag residen, faktor pertumbuhan yang bekerja secara lokal, sitokin proinflamasi, sel apoptosis atau nekrotik, dan produk mikroba menginisiasi monosit untuk berdiferensiasi menjadi kelompok sel MPS.Misalkan ketika C-PRP yang mengandung monosit hasil tinggi disuntikkan ke lingkungan mikro lokal penyakit, monosit cenderung berdiferensiasi menjadi M Φ Untuk menyebabkan perubahan sel yang besar.

Dari monosit ke M Φ Dalam proses transformasi, spesifik M Φ Fenotip.Dalam sepuluh tahun terakhir, sebuah model telah dikembangkan yang mengintegrasikan M Φ. Mekanisme aktivasi yang kompleks digambarkan sebagai polarisasi dua keadaan yang berlawanan: M Φ Fenotipe 1 (M Φ 1, aktivasi Klasik) dan M Φ Fenotipe 2 (M Φ 2, aktivasi alternatif).M Φ 1 ditandai dengan sekresi sitokin inflamasi (IFN- γ) dan oksida nitrat untuk menghasilkan mekanisme pembunuhan patogen yang efektif.M Φ Fenotip juga menghasilkan faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF) dan faktor pertumbuhan fibroblas (FGF).M Φ Fenotipe terdiri dari sel anti inflamasi dengan fagositosis tinggi.M Φ 2 Menghasilkan komponen matriks ekstraseluler, angiogenesis dan kemokin, serta interleukin 10 (IL-10).Selain pertahanan patogen, M Φ Ini juga dapat mengurangi peradangan dan meningkatkan perbaikan jaringan.Patut dicatat bahwa M Φ 2 telah dibagi lagi menjadi M in vitro Φ 2a、M Φ 2b dan M Φ 2. Hal ini bergantung pada stimulus.Terjemahan in vivo dari subtipe ini sulit dilakukan karena jaringan mungkin mengandung gugus M Φ campuran.Menariknya, berdasarkan sinyal lingkungan lokal dan kadar IL-4, M Φ 1 proinflamasi dapat dikonversi untuk mendorong perbaikan M Φ 2. Dari data ini, masuk akal untuk berasumsi bahwa terdapat konsentrasi monosit dan preparat M Φ C-PRP yang tinggi. dapat berkontribusi pada perbaikan jaringan yang lebih baik karena mereka memiliki perbaikan jaringan anti-inflamasi dan kemampuan transduksi sinyal sel.

 

Bingung definisi fraksi sel darah putih pada PRP

Keberadaan sel darah putih dalam botol perawatan PRP bergantung pada alat penyiapan PRP dan mungkin memiliki perbedaan yang signifikan.Ada banyak perselisihan mengenai keberadaan leukosit dan kontribusinya terhadap produk sub-PRP yang berbeda (seperti PRGF, P-PRP, LP-PRP, LR-PRP, P-PRF dan L-PRF) Dalam sebuah tinjauan baru-baru ini, enam pasien diacak uji coba terkontrol (bukti level 1) dan tiga studi komparatif prospektif (bukti level 2) melibatkan 1.055 pasien, menunjukkan bahwa LR-PRP dan LP-PRP memiliki keamanan yang serupa.Penulis menyimpulkan bahwa reaksi merugikan PRP mungkin tidak berhubungan langsung dengan konsentrasi sel darah putih.Dalam penelitian lain, LR-PRP tidak mengubah interleukin inflamasi (IL-1) pada OA lutut β、 IL-6, IL-8 dan IL-17).Hasil ini mendukung pandangan bahwa peran leukosit dalam aktivitas biologis PRP in vivo mungkin berasal dari persilangan antara trombosit dan leukosit.Interaksi ini dapat mendorong biosintesis faktor lain (seperti lipoksigen), yang dapat mengimbangi atau mendorong kemunduran peradangan.Setelah pelepasan awal molekul inflamasi (asam arakidonat, leukotrien, dan prostaglandin), lipoksigen A4 dilepaskan dari trombosit yang diaktifkan untuk mencegah aktivasi neutrofil.Di lingkungan inilah M Φ Fenotipe dari M Φ 1 Beralih ke M Φ 2。 Selain itu, terdapat semakin banyak bukti bahwa sel mononuklear yang bersirkulasi dapat berdiferensiasi menjadi berbagai jenis sel non-fagositik karena potensi majemuknya.

Jenis PRP akan mempengaruhi budaya MSC.Dibandingkan dengan sampel PRP atau PPP murni, LR-PRP dapat menginduksi proliferasi MSC yang berasal dari sumsum tulang (BMMSCs) yang jauh lebih tinggi, dengan pelepasan yang lebih cepat dan aktivitas biologis PGF yang lebih baik.Semua karakteristik ini kondusif untuk menambahkan monosit ke dalam botol pengobatan PRP dan mengenali kemampuan imunomodulator dan potensi diferensiasinya.

 

Regulasi imun bawaan dan adaptif dari PRP

Fungsi fisiologis trombosit yang paling terkenal adalah mengendalikan pendarahan.Mereka terakumulasi di lokasi kerusakan jaringan dan pembuluh darah yang rusak.Peristiwa ini disebabkan oleh ekspresi integrin dan selektin yang merangsang adhesi dan agregasi trombosit.Endotelium yang rusak semakin memperburuk proses ini, dan kolagen yang terbuka serta protein matriks subendotel lainnya mendorong aktivasi trombosit yang dalam.Dalam hal ini, peran penting interaksi antara faktor von Willebrand (vWF) dan glikoprotein (GP), khususnya GP-Ib, telah terbukti.Setelah aktivasi trombosit, trombosit α-、 Padat, lisosom dan butiran T mengatur eksositosis dan melepaskan isinya ke lingkungan ekstraseluler.

 

Molekul adhesi trombosit

Untuk lebih memahami peran PRP dalam jaringan inflamasi dan trombosit dalam respons imun, kita harus memahami bagaimana perbedaan reseptor permukaan trombosit (integrin) dan molekul adhesi persimpangan (JAM) serta interaksi sel dapat memulai proses penting dalam imunitas bawaan dan adaptif.

Integrin adalah molekul adhesi permukaan sel yang ditemukan di berbagai jenis sel dan diekspresikan dalam jumlah besar pada trombosit.Integrin termasuk a5b1, a6b1, a2b1 LFA-2, (GPIA/IIa) dan aIIbb3 (GPIIb/IIIa).Biasanya, mereka ada dalam keadaan statis dan afinitas rendah.Setelah aktivasi, mereka beralih ke keadaan afinitas pengikatan ligan yang tinggi.Integrin memiliki fungsi berbeda pada trombosit dan berpartisipasi dalam interaksi trombosit dengan beberapa jenis sel darah putih, sel endotel, dan matriks ekstraseluler.Selain itu, kompleks GP-Ib-V-IX diekspresikan pada membran trombosit dan merupakan reseptor utama untuk berikatan dengan von vWF.Interaksi ini memediasi kontak awal antara trombosit dan struktur subendotel yang terbuka.Integrin trombosit dan kompleks GP berhubungan dengan berbagai proses inflamasi dan berperan penting dalam pembentukan kompleks trombosit-leukosit.Secara khusus, integrin aIIbb3 diperlukan untuk membentuk kompleks yang stabil dengan menggabungkan fibrinogen dengan reseptor antigen makrofag 1 (Mac-1) pada neutrofil.

Trombosit, neutrofil, dan sel endotel vaskular mengekspresikan molekul adhesi sel spesifik, yang disebut selektin.Pada kondisi inflamasi, trombosit mengekspresikan P-selectin dan neutrofil L-selectin.Setelah aktivasi trombosit, P-selectin dapat berikatan dengan ligan PSGL-1 yang ada pada neutrofil dan monosit.Selain itu, pengikatan PSGL-1 memulai reaksi kaskade sinyal intraseluler, yang mengaktifkan neutrofil melalui integrin neutrofil Mac-1 dan antigen terkait fungsi limfosit 1 (LFA-1).Mac-1 yang teraktivasi berikatan dengan GPIb atau GPIIb/IIIa pada trombosit melalui fibrinogen, sehingga menstabilkan interaksi antara neutrofil dan trombosit.Selain itu, LFA-1 yang teraktivasi dapat bergabung dengan molekul adhesi antar sel trombosit 2 untuk lebih menstabilkan kompleks neutrofil-trombosit guna meningkatkan adhesi jangka panjang dengan sel.

 

Trombosit dan leukosit memainkan peran penting dalam respon imun bawaan dan adaptif

Tubuh dapat mengenali benda asing dan jaringan yang terluka pada penyakit akut atau kronis untuk memulai reaksi kaskade penyembuhan luka dan jalur inflamasi.Sistem kekebalan bawaan dan adaptif melindungi inang dari infeksi, dan sel darah putih berperan penting dalam tumpang tindih antara kedua sistem tersebut.Secara khusus, monosit, makrofag, neutrofil, dan sel pembunuh alami memainkan peran penting dalam sistem bawaan, sedangkan limfosit dan subsetnya memainkan peran serupa dalam sistem kekebalan adaptif.

Trombosit-dan-leukosit

 

Interaksi trombosit dan leukosit dalam interaksi sel imun bawaan.Trombosit berinteraksi dengan neutrofil dan monosit, dan akhirnya dengan M Φ Berinteraksi, menyesuaikan dan meningkatkan fungsi efektornya.Interaksi trombosit-leukosit ini menyebabkan peradangan melalui mekanisme yang berbeda, termasuk NETosis.Singkatan: MPO: myeloperoxidase, ROS: spesies oksigen reaktif, TF: faktor jaringan, NET: perangkap ekstraseluler neutrofil, NF- κ B: Faktor nuklir kappa B, M Φ: Makrofag.

 

Sistem imun bawaan

Peran sistem imun bawaan adalah untuk mengidentifikasi mikroorganisme atau fragmen jaringan invasif secara non-spesifik dan merangsang pembersihannya.Ketika struktur molekul tertentu yang disebut reseptor pengenalan pola ekspresi permukaan (PRR) bergabung dengan pola molekuler terkait patogen dan pola molekuler terkait kerusakan, sistem kekebalan bawaan akan diaktifkan.Ada banyak jenis PRR, termasuk Toll-like receptor (TLR) dan RIG-1 like receptor (RLR).Reseptor ini dapat mengaktifkan faktor transkripsi utama kappa B (NF- κ B) Ia juga mengatur berbagai aspek respon imun bawaan dan adaptif.Menariknya, trombosit juga mengekspresikan berbagai molekul reseptor imunoregulasi pada permukaan dan sitoplasmanya, seperti P-selectin, ligan protein transmembran CD40 (CD40L), sitokin (seperti IL-1 β、 TGF- β) dan TLR spesifik trombosit. Oleh karena itu, trombosit dapat berinteraksi dengan berbagai sel imun.

 

Interaksi trombosit-sel darah putih dalam imunitas bawaan

Ketika trombosit memasuki atau menyerang aliran darah atau jaringan, trombosit adalah salah satu sel yang pertama kali mendeteksi cedera endotel dan patogen mikroba.Agregasi trombosit dan mendorong pelepasan agonis trombosit ADP, trombin dan vWF, mengakibatkan aktivasi trombosit dan ekspresi reseptor kemokin trombosit C, CC, CXC dan CX3C, sehingga menyebabkan trombosit di tempat yang terinfeksi atau cedera.

Sistem kekebalan bawaan secara genetik telah ditentukan sebelumnya untuk mendeteksi penyerang, seperti virus, bakteri, parasit dan racun, atau luka dan luka pada jaringan.Ini adalah sistem non-spesifik, karena patogen apa pun akan diidentifikasi sebagai benda asing atau bukan milik sendiri dan dapat ditemukan dengan cepat.Sistem kekebalan bawaan bergantung pada sekumpulan protein dan fagosit, yang mengenali karakteristik patogen yang terpelihara dengan baik dan dengan cepat mengaktifkan respons imun untuk membantu menghilangkan penyerang, bahkan jika inangnya belum pernah terpapar patogen tertentu sebelumnya.

Neutrofil, monosit, dan sel dendritik adalah sel imun bawaan yang paling umum dalam darah.Perekrutan mereka diperlukan untuk respon imun awal yang memadai.Ketika PRP digunakan dalam pengobatan regeneratif, interaksi trombosit-sel darah putih mengatur peradangan, penyembuhan luka, dan perbaikan jaringan.TLR-4 pada trombosit menstimulasi interaksi trombosit-neutrofil, yang mengatur apa yang disebut ledakan oksidatif leukosit dengan mengatur pelepasan spesies oksigen reaktif (ROS) dan myeloperoxidase (MPO) dari neutrofil.Selain itu, interaksi antara degranulasi trombosit-neutrofil dan neutrofil mengarah pada pembentukan perangkap neutrofil-ekstraseluler (NETs).NET terdiri dari inti neutrofil dan isi intraseluler neutrofil lainnya, yang dapat menangkap bakteri dan membunuhnya melalui NETosis.Pembentukan NET merupakan mekanisme pembunuhan neutrofil yang penting.

Setelah aktivasi trombosit, monosit dapat bermigrasi ke jaringan yang sakit dan mengalami degeneratif, di mana monosit melakukan aktivitas adhesi dan mengeluarkan molekul inflamasi yang dapat mengubah sifat kemotaksis dan proteolitik.Selain itu, trombosit dapat menginduksi aktivasi NF-κ B monosit untuk mengatur fungsi efektor monosit, yang merupakan mediator utama respon inflamasi dan aktivasi serta diferensiasi sel imun.Trombosit selanjutnya mendorong ledakan oksidatif monosit endogen untuk mendorong penghancuran patogen fagositik.Pelepasan MPO dimediasi oleh interaksi langsung antara trombosit-monosit CD40L-MAC-1.Menariknya, ketika P-selectin mengaktifkan trombosit dalam kondisi jaringan inflamasi akut dan kronis, kemokin turunan trombosit PF4, RANTES, IL-1 β, dan CXCL-12 dapat mencegah apoptosis spontan monosit, namun mendorong diferensiasinya menjadi makrofag.

 

Sistem imun adaptif

Setelah sistem imun bawaan non-spesifik mengenali kerusakan mikroba atau jaringan, sistem imun adaptif spesifik akan mengambil alih.Sistem adaptif mencakup limfosit B yang mengikat antigen (sel B) dan limfosit T konvensional (Treg) yang mengoordinasikan pembersihan patogen.Sel T secara kasar dapat dibagi menjadi sel T pembantu (sel Th) dan sel T sitotoksik (sel Tc, juga dikenal sebagai sel T pembunuh).Sel Th selanjutnya dibagi menjadi sel Th1, Th2 dan Th17, yang memiliki fungsi utama dalam peradangan.Sel Th dapat mengeluarkan sitokin proinflamasi (misalnya IFN- γ、 TNF- β) dan beberapa interleukin (misalnya IL-17). Mereka sangat efektif dalam mencegah infeksi virus dan bakteri intraseluler. Sel Th merangsang proliferasi dan diferensiasi sel yang terlibat dalam respon imun.Sel Tc adalah sel efektor, yang dapat menghilangkan mikroorganisme dan sel intraseluler dan ekstraseluler yang ditargetkan.

Menariknya, sel Th2 menghasilkan IL-4 dan mempengaruhi M Φ Polarisasi, M Φ Regenerasi terpandu M Φ 2 Fenotipe, sedangkan IFN- γ M Φ Berubah menjadi Fenotip M Φ 1 inflamasi, yang bergantung pada dosis dan waktu sitokin.Setelah IL-4 diaktifkan, M Φ 2 menginduksi sel Treg untuk berdiferensiasi menjadi sel Th2, dan kemudian menghasilkan IL-4 tambahan (loop umpan balik positif).Sel Th mengubah M Φ Fenotip diarahkan ke fenotip regeneratif sebagai respons terhadap agen biologis yang berasal dari jaringan.Mekanisme ini didasarkan pada bukti bahwa sel Th memainkan peran penting dalam mengendalikan peradangan dan perbaikan jaringan.

 

Interaksi trombosit-sel darah putih dalam imunitas adaptif

Sistem kekebalan adaptif menggunakan reseptor antigen spesifik dan mengingat patogen yang ditemui sebelumnya, dan menghancurkannya ketika bertemu dengan inang.Namun, respons imun adaptif ini berkembang secara perlahan.Konias dkk.Hal ini menunjukkan bahwa komponen trombosit berkontribusi terhadap persepsi risiko dan perbaikan jaringan, dan bahwa interaksi antara trombosit dan leukosit mendorong aktivasi respon imun adaptif.

Selama respons imun adaptif, trombosit meningkatkan respons monosit dan makrofag melalui pematangan sel DC dan NK, yang mengarah pada respons sel T dan sel B spesifik.Oleh karena itu, komponen butiran trombosit secara langsung mempengaruhi imunitas adaptif dengan mengekspresikan CD40L, sebuah molekul yang penting untuk mengatur respons imun adaptif.Trombosit melalui CD40L tidak hanya berperan dalam presentasi antigen, tetapi juga mempengaruhi reaksi sel T.Liu dkk.Ditemukan bahwa trombosit mengatur respons sel T CD4 dengan cara yang kompleks.Perbedaan regulasi subset sel T CD4 ini berarti bahwa trombosit mendorong sel T CD4 untuk merespons rangsangan inflamasi, sehingga menghasilkan respons proinflamasi dan antiinflamasi yang kuat.

Trombosit juga mengatur respons adaptif yang dimediasi sel B terhadap patogen mikroba.Telah diketahui bahwa CD40L pada sel T CD4 teraktivasi akan memicu CD40 sel B, memberikan sinyal kedua yang diperlukan untuk aktivasi limfosit B yang bergantung pada sel T, konversi alotipe selanjutnya, serta diferensiasi dan proliferasi sel B.Secara umum, hasilnya dengan jelas menunjukkan berbagai fungsi trombosit dalam imunitas adaptif, menunjukkan bahwa trombosit menghubungkan interaksi antara sel T dan sel B melalui CD40-CD40L, sehingga meningkatkan respons sel B yang bergantung pada sel T.Selain itu, trombosit kaya akan reseptor permukaan sel, yang dapat mendorong aktivasi trombosit dan melepaskan sejumlah besar molekul aktif inflamasi dan biologis yang disimpan dalam partikel trombosit berbeda, sehingga memengaruhi respons imun bawaan dan adaptif.

 

Perluasan peran serotonin yang berasal dari trombosit dalam PRP

Serotonin (5-hydroxytryptamine, 5-HT) memiliki peran penting yang jelas dalam sistem saraf pusat (SSP), termasuk toleransi nyeri.Diperkirakan sebagian besar 5-HT manusia diproduksi di saluran cerna kemudian melalui sirkulasi darah, dimana diserap oleh trombosit melalui serotonin reuptake transporter dan disimpan dalam partikel padat dengan konsentrasi tinggi (65 mmol/L).5-HT adalah neurotransmitter dan hormon terkenal yang membantu mengatur berbagai proses neuropsikologis di SSP (5-HT pusat).Namun, sebagian besar 5-HT ada di luar SSP (peripheral 5-HT), dan terlibat dalam pengaturan fungsi biologis sistemik dan seluler dari berbagai sistem organ, termasuk sistem fungsional kardiovaskular, paru-paru, gastrointestinal, urogenital, dan trombosit.5-HT memiliki metabolisme yang bergantung pada konsentrasi pada berbagai jenis sel, termasuk adiposit, sel epitel, dan sel darah putih.5-HT perifer juga merupakan modulator imun yang kuat, yang dapat merangsang atau menghambat peradangan dan mempengaruhi berbagai sel imun melalui reseptor 5-HT spesifiknya (5HTR).

 

Mekanisme parakrin dan autokrin HT

Aktivitas 5-HT dimediasi oleh interaksinya dengan 5HTRs, yang merupakan superfamili dengan tujuh anggota (5-HT 1 – 7) dan setidaknya 14 subtipe reseptor berbeda, termasuk anggota 5-HT 7 yang baru ditemukan, periferal dan berfungsi dalam manajemen nyeri.Dalam proses degranulasi trombosit, trombosit yang teraktivasi mengeluarkan sejumlah besar 5-HT yang berasal dari trombosit, yang dapat meningkatkan kontraksi pembuluh darah dan merangsang aktivasi trombosit dan limfosit yang berdekatan melalui ekspresi 5-HTR pada sel endotel, sel otot polos dan sel endotel. sel imun.Pacala dkk.Efek mitosis 5-HT pada sel endotel vaskular dipelajari, dan potensi mendorong pertumbuhan pembuluh darah yang rusak dengan merangsang angiogenesis telah ditentukan.Bagaimana proses-proses ini diatur masih belum sepenuhnya jelas, namun mungkin melibatkan jalur sinyal dua arah yang berbeda dalam sirkuit mikro jaringan untuk mengatur fungsi sel endotel vaskular dan sel otot polos, fibroblas, dan sel imun melalui reseptor 5-HT spesifik pada sel-sel ini. .Fungsi autokrin trombosit 5-HT setelah aktivasi trombosit telah dijelaskan [REF].Pelepasan 5-HT meningkatkan aktivasi trombosit dan perekrutan trombosit yang bersirkulasi, yang mengarah pada aktivasi reaksi kaskade sinyal dan efektor hulu yang mendukung reaktivitas trombosit.

 

Efek imunomodulator 5-HT

Semakin banyak bukti yang menunjukkan bahwa serotonin dapat berperan dalam 5HTR yang berbeda sebagai modulator imun.Menurut 5HTR yang diekspresikan dalam berbagai leukosit yang terlibat dalam reaksi inflamasi, 5-HT yang diturunkan dari trombosit bertindak sebagai pengatur kekebalan pada sistem kekebalan bawaan dan adaptif.5-HT dapat merangsang proliferasi Treg dan mengatur fungsi sel B, sel pembunuh alami, dan neutrofil dengan merekrut DC dan monosit ke lokasi peradangan.Penelitian terbaru menunjukkan bahwa 5-HT yang berasal dari trombosit dapat mengatur fungsi sel kekebalan dalam kondisi tertentu.Oleh karena itu, dengan menggunakan C-PRP, konsentrasi trombosit yang lebih besar dari 1 × 10 6/µ L dapat secara signifikan membantu mengangkut konsentrasi 5-HT yang berasal dari trombosit besar ke jaringan.Dalam lingkungan mikro yang ditandai dengan komponen inflamasi, PRP dapat berinteraksi dengan beberapa sel imun yang berperan penting dalam patologi ini, sehingga dapat mempengaruhi hasil klinis.

Efek imunomodulator-5-HT

Gambar yang menampilkan respons 5-HT multifaset setelah aktivasi trombosit PRP inflamasi.Setelah aktivasi trombosit, trombosit melepaskan butirannya, termasuk 5-HT dalam butiran padat, yang memiliki berbagai efek berbeda pada berbagai sel imun, sel endotel, dan sel otot polos.Singkatan: SMC: sel otot polos, EC: sel endotel, Treg: limfosit T konvensional, M Φ: Makrofag, DC: sel dendritik, IL: interleukin, IFN- γ: Interferon γ。 Dimodifikasi dan diadaptasi dari Everts dkk.dan Hull dkk.

 

Efek analgesik dari PRP

Trombosit yang teraktivasi akan melepaskan banyak mediator pro-inflamasi dan anti-inflamasi, yang tidak hanya menyebabkan rasa sakit, tetapi juga mengurangi peradangan dan nyeri.Setelah diterapkan, dinamika trombosit PRP mengubah lingkungan mikro sebelum perbaikan dan regenerasi jaringan melalui berbagai jalur kompleks yang terkait dengan anabolisme dan katabolisme, proliferasi sel, diferensiasi, dan regulasi sel induk.Karakteristik PRP ini menyebabkan penerapan PRP dalam berbagai kondisi patologis klinis yang biasanya berhubungan dengan nyeri kronis (seperti cedera olahraga, penyakit ortopedi, penyakit tulang belakang, dan luka kronis kompleks), meskipun mekanisme pastinya belum sepenuhnya ditentukan.

Pada tahun 2008, Evertz dkk.Ini adalah uji coba terkontrol secara acak pertama yang melaporkan efek analgesik dari sediaan PRP, yang dibuat dari lapisan coklat laju sedimentasi eritrosit autolog dan diaktifkan dengan trombin autologus setelah operasi bahu.Mereka mencatat penurunan yang signifikan dalam skor skala analog visual, penggunaan analgesik berbasis opioid, dan rehabilitasi pasca operasi yang lebih berhasil.Patut dicatat bahwa mereka mencerminkan efek analgesik dari trombosit yang diaktifkan dan berspekulasi tentang mekanisme pelepasan 5-HT oleh trombosit.Singkatnya, trombosit tidak aktif dalam PRP yang baru disiapkan.Setelah aktivasi trombosit secara langsung atau tidak langsung (faktor jaringan), trombosit berubah bentuk dan menghasilkan cukup banyak trombosit untuk mendorong agregasi trombosit.Kemudian, mereka melepaskan α- dan partikel padat intraseluler.Jaringan yang diobati dengan PRP teraktivasi akan diserang oleh PGF, sitokin, dan lisosom trombosit lainnya.Lebih khusus lagi, ketika partikel padat melepaskan isinya, mereka akan melepaskan sejumlah besar 5-HT yang mengatur rasa sakit.Pada C-PRP, konsentrasi trombosit 5 sampai 7 kali lebih tinggi dibandingkan pada darah tepi.Oleh karena itu, pelepasan 5-HT dari trombosit sangatlah besar.Menariknya, Sinta dkk.Laporan tersebut mengamati bahwa nyeri berkurang secara signifikan setelah akupunktur dan moksibusi, konsentrasi 5-HT turunan trombosit berkurang secara signifikan, dan kemudian kadar 5-HT plasma meningkat.

Di perifer, trombosit, sel mast, dan sel endotel akan melepaskan 5-HT endogen selama cedera jaringan atau trauma bedah.Menariknya, berbagai reseptor 5-HT pada neuron terdeteksi di area perifer, yang menegaskan bahwa 5-HT dapat mengganggu transmisi nosiseptif di area perifer.Studi-studi ini menunjukkan bahwa 5-HT dapat mempengaruhi transmisi nosiseptif jaringan perifer melalui reseptor 5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4 dan 5-HT7.

Sistem 5-HT mewakili sistem kuat yang dapat mengurangi dan meningkatkan derajat nyeri setelah rangsangan berbahaya.Regulasi sinyal nosiseptif pusat dan perifer serta perubahan sistem 5-HT telah dilaporkan pada pasien dengan nyeri kronis.Dalam beberapa tahun terakhir, sejumlah besar penelitian berfokus pada peran 5-HT dan masing-masing reseptornya dalam memproses dan mengatur informasi berbahaya, sehingga menghasilkan obat-obatan seperti inhibitor reuptake serotonin selektif (SSRI).Obat ini menghambat pengambilan kembali serotonin ke neuron prasinaps setelah pelepasan serotonin.Ini mempengaruhi durasi dan intensitas komunikasi serotonin dan merupakan pengobatan alternatif untuk nyeri kronis.Penelitian klinis lebih lanjut diperlukan untuk memahami dengan jelas mekanisme molekuler regulasi nyeri 5-HT yang diturunkan dari PRP pada penyakit kronis dan degeneratif.

Data lain untuk mengetahui potensi efek analgesik PRP dapat diperoleh setelah uji model hewan analgesik.Kesimpulan statistik komparatif dalam model ini cukup menantang karena penelitian ini mengandung terlalu banyak variabel.Namun demikian, beberapa studi klinis telah membahas efek nosiseptif dan analgesik dari PRP.Beberapa penelitian menunjukkan bahwa pasien yang menerima pengobatan untuk tendinosis atau robekan rotator cuff hanya mengalami sedikit pereda nyeri.Sebaliknya, beberapa penelitian lain menunjukkan bahwa PRP dapat mengurangi atau bahkan menghilangkan rasa sakit pada pasien dengan degenerasi tendon, OA, plantar fasciitis, dan penyakit kaki dan pergelangan kaki lainnya.Konsentrasi trombosit akhir dan komposisi sel biologis telah diidentifikasi sebagai karakteristik utama PRP, yang membantu mengamati efek analgesik yang konsisten setelah penerapan PRP.Variabel lain termasuk metode pemberian PRP, teknologi aplikasi, protokol aktivasi trombosit, tingkat aktivitas biologis PGF dan sitokin yang dilepaskan, jenis jaringan dari aplikasi PRP dan jenis cedera.

Patut dicatat bahwa Kuffler memecahkan potensi PRP dalam mengurangi nyeri pada pasien dengan nyeri neuropatik kronis ringan hingga berat, akibat kerusakan saraf non-regeneratif.Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui apakah nyeri neuropatik dapat dikurangi atau mereda karena PRP mendorong regenerasi aksonal dan reinnervasi saraf target.Anehnya, di antara pasien yang menerima pengobatan, nyeri neuropatik masih hilang atau berkurang setidaknya enam tahun setelah operasi.Selain itu, semua pasien mulai menghilangkan rasa sakitnya dalam waktu tiga minggu setelah penerapan PRP.

Baru-baru ini, efek PRP analgesik serupa telah diamati di bidang luka pasca operasi dan perawatan kulit.Menariknya, penulis melaporkan aspek fisiologis nyeri luka yang berhubungan dengan cedera pembuluh darah dan hipoksia jaringan kulit.Mereka juga membahas pentingnya angiogenesis dalam mengoptimalkan oksigenasi dan pengiriman nutrisi.Studi mereka menunjukkan bahwa dibandingkan dengan kelompok kontrol, pasien yang menerima pengobatan PRP mengalami lebih sedikit rasa sakit dan meningkatkan angiogenesis secara signifikan.Terakhir, Johal dan rekannya melakukan tinjauan sistematis dan meta-analisis dan menyimpulkan bahwa PRP dapat mengurangi nyeri setelah penggunaan PRP sesuai indikasi ortopedi, terutama pada pasien yang menerima pengobatan epikondilitis eksternal dan OA lutut.Sayangnya, penelitian ini tidak merinci efek sel darah putih, konsentrasi trombosit atau penggunaan aktivator trombosit eksogen, karena variabel-variabel ini akan mempengaruhi efektivitas PRP secara keseluruhan.Konsentrasi trombosit PRP yang optimal untuk meredakan nyeri secara maksimal masih belum jelas.Pada model tikus tendinosis, konsentrasi trombosit adalah 1,0 × 10 6 / μ Pada L, nyeri dapat hilang sepenuhnya, sedangkan pereda nyeri yang disebabkan oleh PRP dengan setengah konsentrasi trombosit berkurang secara signifikan.Oleh karena itu, kami mendorong lebih banyak studi klinis untuk menyelidiki efek analgesik dari berbagai sediaan PRP.

 

Efek PRP dan angiogenesis

Sediaan C-PRP dalam pengobatan regeneratif yang tepat memungkinkan pengiriman biomolekul yang dilepaskan oleh trombosit konsentrasi tinggi yang diaktifkan di lokasi jaringan target.Oleh karena itu, berbagai reaksi kaskade telah dimulai, yang berkontribusi terhadap regulasi kekebalan tubuh, proses inflamasi dan angiogenesis untuk mendorong penyembuhan dan perbaikan jaringan.

Angiogenesis adalah proses multi-langkah dinamis yang melibatkan perkecambahan dan pembuluh darah mikro jaringan dari pembuluh darah yang sudah ada sebelumnya.Angiogenesis telah berkembang karena berbagai mekanisme biologis, termasuk migrasi sel endotel, proliferasi, diferensiasi dan pembelahan.Proses seluler ini merupakan prasyarat untuk pembentukan pembuluh darah baru.Mereka penting untuk pertumbuhan pembuluh darah yang sudah ada sebelumnya untuk memulihkan aliran darah dan mendukung aktivitas metabolisme yang tinggi dalam perbaikan jaringan dan regenerasi jaringan.Pembuluh darah baru ini memungkinkan pengiriman oksigen dan nutrisi, serta pembuangan produk sampingan dari jaringan yang dirawat.

Aktivitas angiogenesis diatur oleh stimulasi faktor angiogenik VEGF dan faktor anti-angiogenik (misalnya angiostatin dan trombospondin-1 [TSP-1]).Dalam lingkungan mikro yang sakit dan terdegradasi (termasuk tekanan oksigen rendah, pH rendah, dan kadar asam laktat tinggi), faktor angiogenik lokal akan memulihkan aktivitas angiogenesis.

Beberapa media larut trombosit, seperti FGF dasar dan TGF- β Dan VEGF dapat merangsang sel endotel untuk memproduksi pembuluh darah baru.Landsdown dan Fortier melaporkan berbagai hasil terkait komposisi PRP, termasuk sumber intraplatelet dari banyak regulator angiogenik.Selain itu, mereka menyimpulkan bahwa peningkatan angiogenesis berkontribusi terhadap penyembuhan penyakit MSK di area dengan vaskularisasi buruk, seperti robekan meniskus, cedera tendon, dan area lain dengan vaskularisasi buruk.

 

Mempromosikan dan sifat trombosit anti-angiogenik

Dalam beberapa dekade terakhir, penelitian yang dipublikasikan telah membuktikan bahwa trombosit memainkan peran penting dalam hemostasis primer, pembentukan bekuan darah, faktor pertumbuhan dan pelepasan sitokin, serta regulasi angiogenesis sebagai bagian dari proses perbaikan jaringan.Paradoksnya, butiran PRP α- mengandung gudang faktor pertumbuhan pro-angiogenik, protein anti-angiogenik dan sitokin (seperti PF4, plasminogen activator inhibitor-1 dan TSP-1), dan menargetkan pelepasan faktor spesifik yang berperan. .Berperan dalam angiogenesis.Oleh karena itu, peran PRP dalam mengendalikan regulasi angiogenesis dapat ditentukan oleh aktivasi reseptor permukaan sel spesifik, TGF- β Memulai reaksi pro-angiogenik dan anti-angiogenik.Kemampuan trombosit untuk menjalankan jalur angiogenesis telah dikonfirmasi pada angiogenesis patologis dan angiogenesis tumor.

Faktor pertumbuhan angiogenik yang diturunkan dari trombosit dan faktor pertumbuhan anti-angiogenik, berasal dari α- Dan molekul padat dan perekat.Yang paling penting, secara umum diterima bahwa efek keseluruhan trombosit pada angiogenesis bersifat pro-angiogenik dan merangsang.Terapi PRP diharapkan dapat mengontrol induksi angiogenesis, yang akan berkontribusi terhadap efek pengobatan banyak penyakit, seperti penyembuhan luka dan perbaikan jaringan.Pemberian PRP, lebih khusus lagi pemberian PGF konsentrasi tinggi dan sitokin trombosit lainnya, dapat menginduksi angiogenesis, angiogenesis dan arteriogenesis, karena faktor turunan sel stroma 1a berikatan dengan reseptor CXCR4 pada sel progenitor endotel.Bill dkk.Disarankan bahwa PRP meningkatkan neovaskularisasi iskemik, yang mungkin disebabkan oleh stimulasi angiogenesis, angiogenesis dan arteriogenesis.Dalam model in vitro mereka, proliferasi sel endotel dan pembentukan kapiler diinduksi oleh sejumlah besar PDG yang berbeda, dimana VEGF merupakan stimulator angiogenik utama.Faktor penting dan esensial lainnya untuk memulihkan jalur angiogenesis adalah sinergi antara beberapa PGF.Richardson dkk.Terbukti bahwa aktivitas sinergis faktor angiogenik faktor pertumbuhan turunan trombosit-bb (PDGF-BB) dan VEGF menyebabkan pembentukan jaringan pembuluh darah matang lebih cepat dibandingkan dengan aktivitas faktor pertumbuhan individu.Efek gabungan dari faktor-faktor ini baru-baru ini dikonfirmasi dalam sebuah penelitian tentang peningkatan sirkulasi kolateral serebral pada tikus dengan hipoperfusi jangka panjang.

Yang terpenting, penelitian in vitro mengukur efek proliferasi sel endotel vena umbilikalis manusia dan berbagai konsentrasi trombosit pada pemilihan alat preparasi PRP dan strategi dosis trombosit, dan hasilnya menunjukkan bahwa dosis trombosit optimal adalah 1,5 × 10 6 trombosit/ μ 50. Untuk mempromosikan angiogenesis.Konsentrasi trombosit yang terlalu tinggi dapat menghambat proses angiogenesis sehingga pengaruhnya buruk.

 

Penuaan sel, penuaan dan PRP

Penuaan sel dapat disebabkan oleh berbagai rangsangan.Ini adalah proses di mana sel berhenti membelah dan mengalami perubahan fenotipik unik untuk mencegah pertumbuhan sel rusak yang tidak terbatas, yang berperan penting dalam pencegahan kanker.Dalam proses penuaan fisiologis, penuaan replikasi sel juga akan mendorong penuaan sel, dan kemampuan regenerasi MSC akan berkurang.

 

Efek penuaan dan penuaan sel

Secara in vivo, banyak jenis sel akan menua dan terakumulasi di berbagai jaringan selama penuaan, di antaranya terdapat sejumlah besar sel yang menua.Akumulasi sel-sel penuaan tampaknya meningkat seiring bertambahnya usia, kerusakan sistem kekebalan tubuh, kerusakan jaringan atau faktor-faktor yang berhubungan dengan stres.Mekanisme penuaan sel telah diidentifikasi sebagai faktor patogen penyakit terkait usia, seperti osteoartritis, osteoporosis, dan degenerasi diskus intervertebralis.Berbagai rangsangan akan memperparah penuaan sel.Sebagai tanggapan, fenotip sekretori terkait penuaan (SASP) akan mengeluarkan sel protein dan sitokin dengan konsentrasi tinggi.Fenotipe khusus ini berkaitan dengan sel-sel yang menua, di mana mereka mengeluarkan sitokin inflamasi tingkat tinggi (seperti IL-1, IL-6, IL-8), faktor pertumbuhan (seperti TGF- β, HGF, VEGF, PDGF), MMP, dan cathepsin.Dibandingkan dengan orang muda, SAPS terbukti meningkat seiring bertambahnya usia, karena proses stabilnya rusak, mengakibatkan penuaan sel dan berkurangnya kemampuan regenerasi.Khususnya pada penyakit sendi dan penyakit otot rangka.Dalam hal ini, penuaan imun dianggap sebagai perubahan signifikan dalam spektrum sekresi sel imun, yang menunjukkan bahwa konsentrasi TNF-a, IL-6 dan/atau Il-1b meningkat, yang menyebabkan peradangan kronis tingkat rendah.Perlu dicatat bahwa disfungsi sel induk juga terkait dengan mekanisme otonom non-seluler, seperti penuaan sel, terutama produksi faktor pro-inflamasi dan anti-regeneratif melalui SASP.

Sebaliknya, SASP juga dapat merangsang plastisitas sel dan pemrograman ulang sel yang berdekatan.Selain itu, SASP dapat mengatur komunikasi dengan berbagai mediator imun dan mengaktifkan sel imun untuk mendorong pembersihan sel yang menua.Memahami peran dan fungsi sel-sel yang menua akan berkontribusi pada penyembuhan dan remodeling jaringan otot MSK dan luka kronis.

Patut dicatat bahwa Ritcka dkk.Sebuah studi ekstensif telah dilakukan, dan peran utama dan bermanfaat SASP dalam meningkatkan plastisitas sel dan regenerasi jaringan ditemukan, dan konsep pemberian pengobatan sementara pada sel-sel yang menua diperkenalkan.Mereka dengan hati-hati menyebutkan bahwa penuaan pada dasarnya merupakan proses yang bermanfaat dan regeneratif.

 

Penuaan sel dan potensi PRP

Ketika jumlah sel induk berkurang, penuaan akan mempengaruhi kinerja sel induk.Demikian pula pada manusia, karakteristik sel induk (seperti kekeringan, proliferasi, dan diferensiasi) juga menurun seiring bertambahnya usia.Wang dan Nirmala melaporkan bahwa penuaan akan menurunkan karakteristik sel induk sel tendon dan jumlah reseptor faktor pertumbuhan.Sebuah penelitian pada hewan menunjukkan bahwa konsentrasi PDGF pada kuda muda tinggi.Mereka menyimpulkan bahwa peningkatan jumlah reseptor GF dan jumlah GF pada individu muda mungkin memiliki respons seluler yang lebih baik terhadap pengobatan PRP dibandingkan individu yang lebih tua pada individu muda.Temuan ini mengungkap mengapa pengobatan PRP mungkin kurang efektif atau bahkan tidak efektif pada pasien lanjut usia dengan sel induk lebih sedikit dan “kualitas buruk”.Telah terbukti bahwa proses penuaan tulang rawan dibalik dan masa istirahat kondrosit meningkat setelah injeksi PRP.Jia dkk.Hal ini digunakan untuk mempelajari fibroblas kulit tikus secara in vitro photoaging, dengan dan tanpa pengobatan PRP, untuk memperjelas mekanisme penanggulangan PGF dalam model ini.Kelompok PRP menunjukkan efek langsung pada matriks ekstraseluler, peningkatan kolagen tipe I dan penurunan sintesis metalloproteinase, menunjukkan bahwa PRP dapat menangkal penuaan sel, dan juga pada penyakit degeneratif MSK.

Dalam penelitian lain, PRP digunakan untuk mengumpulkan sel induk sumsum tulang tua dari tikus tua.Telah ditentukan bahwa PRP dapat memulihkan berbagai fungsi sel induk dari penuaan, seperti proliferasi sel dan pembentukan koloni, serta merekonstruksi penanda yang terkait dengan penuaan sel.

Baru-baru ini, Oberlohr dan rekan-rekannya secara ekstensif mempelajari peran penuaan sel dalam melemahkan regenerasi otot, dan mengevaluasi PRP dan plasma miskin trombosit (PPP) sebagai pilihan pengobatan biologis untuk perbaikan otot rangka.Mereka membayangkan bahwa pengobatan PRP atau PPP untuk perbaikan otot rangka akan didasarkan pada faktor biologis yang disesuaikan dengan penanda sel spesifik SASP dan faktor lain yang mengarah pada perkembangan fibrosis.

Masuk akal untuk percaya bahwa sebelum penerapan PRP, penuaan sel yang ditargetkan dapat meningkatkan karakteristik regenerasi kemanjuran pengobatan biologis dengan mengurangi faktor SASP lokal.Telah disarankan bahwa pilihan lain untuk meningkatkan hasil pengobatan PRP dan PPP untuk regenerasi otot rangka adalah dengan menghilangkan sel-sel penuaan secara selektif dengan pemulung yang menua.Tidak ada keraguan bahwa hasil penelitian terbaru mengenai efek PRP terhadap penuaan dan penuaan sel sangat menarik, namun masih dalam tahap awal.Oleh karena itu, tidak masuk akal untuk memberikan saran apa pun saat ini.

 

 

 

 

(Isi artikel ini dicetak ulang, dan kami tidak memberikan jaminan tersurat maupun tersirat atas keakuratan, keandalan, atau kelengkapan konten yang terkandung dalam artikel ini, dan kami tidak bertanggung jawab atas pendapat artikel ini, harap dipahami.)


Waktu posting: 01-03-2023