Terapi sel autologus yang muncul menggunakan plasma kaya trombosit (PRP) mungkin memainkan peran tambahan dalam berbagai rencana pengobatan pengobatan regeneratif.Terdapat permintaan global yang belum terpenuhi akan strategi perbaikan jaringan untuk merawat pasien dengan penyakit muskuloskeletal (MSK) dan tulang belakang, osteoartritis (OA), serta luka kronis yang kompleks dan sulit disembuhkan.Terapi PRP didasarkan pada fakta bahwa faktor pertumbuhan trombosit (PGF) mendukung penyembuhan luka dan perbaikan kaskade (peradangan, proliferasi, dan remodeling).Sejumlah formulasi PRP yang berbeda telah dievaluasi dari penelitian pada manusia, in vitro dan hewan.Namun, rekomendasi penelitian in vitro dan hewan biasanya memberikan hasil klinis yang berbeda, karena sulit untuk menerjemahkan hasil penelitian non-klinis dan rekomendasi metode ke dalam pengobatan klinis pada manusia.Dalam beberapa tahun terakhir, kemajuan telah dicapai dalam pemahaman konsep teknologi PRP dan agen biologis, dan instruksi penelitian baru serta indikasi baru telah diusulkan.Dalam ulasan ini, kami akan membahas kemajuan terkini dalam persiapan dan komposisi PRP, termasuk dosis trombosit, aktivitas leukosit dan regulasi imun bawaan dan adaptif, efek 5-hydroxytryptamine (5-HT) dan pereda nyeri.Selain itu, kami membahas mekanisme PRP terkait peradangan dan angiogenesis selama perbaikan dan regenerasi jaringan.Terakhir, kami akan meninjau efek beberapa obat terhadap aktivitas PRP.
Plasma kaya trombosit autologus (PRP) adalah bagian cair dari darah tepi autologus setelah pengobatan, dan konsentrasi trombosit lebih tinggi dari nilai awal.Terapi PRP telah digunakan untuk berbagai indikasi selama lebih dari 30 tahun, sehingga menimbulkan minat yang besar terhadap potensi PRP autogenous dalam pengobatan regeneratif.Istilah agen biologis ortopedi baru-baru ini diperkenalkan untuk mengobati penyakit muskuloskeletal (MSK), dan telah mencapai hasil yang menjanjikan dalam kemampuan regenerasi campuran sel PRP bioaktif heterogen.Saat ini, terapi PRP merupakan pilihan pengobatan yang tepat dengan manfaat klinis, dan hasil yang dilaporkan pada pasien cukup menggembirakan.Namun, ketidakkonsistenan hasil pasien dan wawasan baru telah menimbulkan tantangan terhadap kepraktisan penerapan klinis PRP.Salah satu alasannya mungkin karena jumlah dan variabilitas PRP dan sistem jenis PRP di pasaran.Perangkat ini berbeda dalam hal volume pengumpulan PRP dan skema persiapan, sehingga menghasilkan karakteristik PRP dan agen biologis yang unik.Selain itu, kurangnya konsensus mengenai standarisasi skema persiapan PRP dan laporan lengkap agen biologis dalam aplikasi klinis menyebabkan hasil laporan tidak konsisten.Banyak upaya telah dilakukan untuk mengkarakterisasi dan mengklasifikasikan PRP atau produk turunan darah dalam aplikasi pengobatan regeneratif.Selain itu, turunan trombosit, seperti lisat trombosit manusia, telah diusulkan untuk penelitian sel induk ortopedi dan in vitro.
Salah satu komentar pertama mengenai PRP diterbitkan pada tahun 2006. Fokus utama dari tinjauan ini adalah fungsi dan cara kerja trombosit, efek PRP pada setiap tahap kaskade penyembuhan, dan peran inti dari faktor pertumbuhan turunan trombosit. dalam berbagai indikasi PRP.Pada tahap awal penelitian PRP, perhatian utama pada PRP atau PRP-gel adalah keberadaan dan fungsi spesifik dari beberapa faktor pertumbuhan trombosit (PGF).
Dalam makalah ini, kami akan membahas secara ekstensif perkembangan terkini dari berbagai struktur partikel PRP dan reseptor membran sel trombosit serta pengaruhnya terhadap regulasi imun sistem imun bawaan dan adaptif.Selain itu, peran sel individu yang mungkin ada dalam botol pengobatan PRP dan pengaruhnya terhadap proses regenerasi jaringan akan dibahas secara rinci.Selain itu, kemajuan terkini dalam memahami agen biologis PRP, dosis trombosit, efek spesifik sel darah putih spesifik, dan efek konsentrasi PGF dan sitokin terhadap efek nutrisi sel induk mesenkim (MSC) akan dijelaskan, termasuk penargetan PRP yang berbeda. lingkungan sel dan jaringan setelah transduksi sinyal sel dan efek parakrin.Demikian pula, kita akan membahas mekanisme PRP terkait peradangan dan angiogenesis selama perbaikan dan regenerasi jaringan.Terakhir, kami akan meninjau efek analgesik PRP, pengaruh beberapa obat terhadap aktivitas PRP, dan kombinasi PRP dan program rehabilitasi.
Prinsip dasar terapi plasma kaya trombosit klinis
Sediaan PRP semakin populer dan banyak digunakan di berbagai bidang medis.Prinsip ilmiah dasar pengobatan PRP adalah bahwa suntikan trombosit terkonsentrasi pada lokasi cedera dapat memulai perbaikan jaringan, sintesis jaringan ikat baru dan rekonstruksi sirkulasi darah dengan melepaskan banyak faktor aktif biologis (faktor pertumbuhan, sitokin, lisosom) dan protein adhesi yang bertanggung jawab untuk memulai reaksi kaskade hemostatik.Selain itu, protein plasma (misalnya fibrinogen, protrombin, dan fibronektin) terdapat dalam komponen plasma miskin trombosit (PPP).Konsentrat PRP dapat merangsang pelepasan faktor pertumbuhan secara hiperfisiologis untuk memulai penyembuhan cedera kronis dan mempercepat proses perbaikan cedera akut.Pada semua tahap proses perbaikan jaringan, berbagai faktor pertumbuhan, sitokin, dan pengatur aksi lokal meningkatkan sebagian besar fungsi dasar sel melalui mekanisme endokrin, parakrin, autokrin, dan endokrin.Keuntungan utama PRP mencakup keamanannya dan teknologi persiapan yang cerdik dari peralatan komersial saat ini, yang dapat digunakan untuk menyiapkan agen biologis yang dapat digunakan secara luas.Yang terpenting, dibandingkan dengan kortikosteroid pada umumnya, PRP merupakan produk autogenous yang tidak memiliki efek samping yang diketahui.Namun, belum ada pengaturan yang jelas mengenai formula dan komposisi komposisi PRP suntik, dan komposisi PRP mengalami perubahan besar pada trombosit, kandungan sel darah putih (WBC), polusi sel darah merah (RBC), dan konsentrasi PGF.
Terminologi dan klasifikasi PRP
Selama beberapa dekade, pengembangan produk PRP yang digunakan untuk merangsang perbaikan dan regenerasi jaringan telah menjadi bidang penelitian penting dalam bidang biomaterial dan ilmu obat.Kaskade penyembuhan jaringan mencakup banyak partisipan, termasuk trombosit dan faktor pertumbuhannya serta butiran sitokin, sel darah putih, matriks fibrin, dan banyak sitokin sinergis lainnya.Dalam proses kaskade ini akan terjadi proses koagulasi yang kompleks, meliputi aktivasi trombosit dan selanjutnya densifikasi dan α- Pelepasan isi partikel trombosit, agregasi fibrinogen (dilepaskan oleh trombosit atau bebas dalam plasma) ke dalam jaringan fibrin, dan pembentukan dari emboli trombosit.
PRP “Universal” menyimulasikan awal penyembuhan
Pada awalnya, istilah “plasma kaya trombosit (PRP)” mengacu pada konsentrat trombosit yang digunakan dalam pengobatan transfusi darah, dan masih digunakan sampai sekarang.Awalnya, produk PRP ini hanya digunakan sebagai perekat jaringan fibrin, sedangkan trombosit hanya digunakan untuk mendukung polimerisasi fibrin yang lebih kuat guna meningkatkan penyegelan jaringan, bukan sebagai stimulan penyembuhan.Setelah itu, teknologi PRP dirancang untuk mensimulasikan inisiasi kaskade penyembuhan.Selanjutnya, teknologi PRP dirangkum melalui kemampuannya dalam memperkenalkan dan melepaskan faktor pertumbuhan ke dalam lingkungan mikro lokal.Antusiasme terhadap pemberian PGF seringkali menyembunyikan peran penting komponen lain dalam turunan darah tersebut.Antusiasme ini semakin menguat karena minimnya data ilmiah, keyakinan mistik, kepentingan komersial, serta minimnya standardisasi dan klasifikasi.
Biologi konsentrat PRP sama rumitnya dengan darah itu sendiri, dan mungkin lebih kompleks dibandingkan obat tradisional.Produk PRP adalah biomaterial hidup.Hasil penerapan PRP klinis bergantung pada karakteristik intrinsik, universal, dan adaptif darah pasien, termasuk berbagai komponen seluler lain yang mungkin ada dalam sampel PRP dan lingkungan mikro lokal reseptor, yang dapat berada dalam keadaan akut atau kronis.
Ringkasan terminologi PRP yang membingungkan dan sistem klasifikasi yang diusulkan
Selama bertahun-tahun, praktisi, ilmuwan, dan perusahaan telah diganggu oleh kesalahpahaman awal dan cacat produk PRP serta perbedaan istilahnya.Beberapa penulis mendefinisikan PRP sebagai trombosit saja, sementara yang lain menunjukkan bahwa PRP juga mengandung sel darah merah, berbagai sel darah putih, fibrin dan protein bioaktif dengan konsentrasi yang meningkat.Oleh karena itu, banyak agen biologis PRP yang berbeda telah diperkenalkan ke dalam praktik klinis.Sangat mengecewakan bahwa literatur biasanya tidak memberikan penjelasan rinci tentang agen biologis.Kegagalan standardisasi penyiapan produk dan pengembangan sistem klasifikasi selanjutnya menyebabkan penggunaan sejumlah besar produk PRP yang dijelaskan dengan istilah dan singkatan yang berbeda.Tidak mengherankan bahwa perubahan dalam persiapan PRP menyebabkan hasil yang tidak konsisten pada pasien.
Kingsley pertama kali menggunakan istilah “plasma kaya trombosit” pada tahun 1954. Bertahun-tahun kemudian, Ehrenfest dkk.Sistem klasifikasi pertama berdasarkan tiga variabel utama (kandungan trombosit, leukosit dan fibrin) diusulkan, dan banyak produk PRP dibagi menjadi empat kategori: P-PRP, LR-PRP, fibrin kaya trombosit murni (P-PRF) dan leukosit PRF kaya (L-PRF).Produk-produk ini disiapkan dengan sistem tertutup otomatis atau protokol manual.Sementara itu, Everts dkk.Pentingnya penyebutan sel darah putih dalam sediaan PRP ditekankan.Mereka juga merekomendasikan penggunaan terminologi yang tepat untuk menunjukkan versi preparat PRP dan gel trombosit yang tidak aktif atau teraktivasi.
Delong dkk.mengusulkan sistem klasifikasi PRP yang disebut trombosit, sel darah putih teraktivasi (PAW) berdasarkan jumlah absolut trombosit, termasuk empat rentang konsentrasi trombosit.Parameter lainnya termasuk penggunaan aktivator trombosit dan ada tidaknya sel darah putih (yaitu neutrofil).Mishra dkk.Sistem klasifikasi serupa diusulkan.Beberapa tahun kemudian, Mautner dan rekan-rekannya menjelaskan sistem klasifikasi yang lebih rumit dan rinci (PLRA).Penulis membuktikan bahwa penting untuk menggambarkan jumlah trombosit absolut, kandungan sel darah putih (positif atau negatif), persentase neutrofil, sel darah merah (positif atau negatif) dan apakah aktivasi eksogen digunakan.Pada tahun 2016, Magalon dkk.Klasifikasi DEPA berdasarkan dosis injeksi trombosit, efisiensi produksi, kemurnian PRP yang diperoleh dan proses aktivasi telah dipublikasikan.Selanjutnya, Lana dan rekan-rekannya memperkenalkan sistem klasifikasi MARSPILL, dengan fokus pada sel mononuklear darah tepi.Baru-baru ini, Komite Standardisasi Ilmiah menganjurkan penggunaan sistem klasifikasi Masyarakat Internasional untuk Trombosis dan Hemostasis, yang didasarkan pada serangkaian rekomendasi konsensus untuk menstandarisasi penggunaan produk trombosit dalam aplikasi pengobatan regeneratif, termasuk produk trombosit beku dan dicairkan.
Berdasarkan sistem klasifikasi PRP yang diusulkan oleh berbagai praktisi dan peneliti, banyak upaya yang gagal untuk menstandarisasi produksi, definisi dan formula PRP untuk digunakan oleh dokter dapat menarik kesimpulan yang adil, yang kemungkinan besar tidak akan terjadi dalam beberapa tahun ke depan. , teknologi produk PRP klinis terus berkembang, dan data ilmiah menunjukkan bahwa persiapan PRP yang berbeda diperlukan untuk menangani patologi yang berbeda dalam kondisi tertentu.Oleh karena itu, kami berharap parameter dan variabel produksi PRP yang ideal akan terus berkembang di masa depan.
Metode persiapan PRP sedang berlangsung
Menurut terminologi PRP dan deskripsi produk, beberapa sistem klasifikasi dirilis untuk formulasi PRP yang berbeda.Sayangnya, tidak ada konsensus mengenai sistem klasifikasi komprehensif PRP atau darah autologus dan produk darah lainnya.Idealnya, sistem klasifikasi harus memperhatikan berbagai karakteristik PRP, definisi dan nomenklatur yang sesuai terkait dengan keputusan pengobatan pasien dengan penyakit tertentu.Saat ini, aplikasi ortopedi membagi PRP menjadi tiga kategori: fibrin kaya trombosit murni (P-PRF), PRP kaya leukosit (LR-PRP) dan PRP kekurangan leukosit (LP-PRP).Meskipun lebih spesifik daripada definisi produk PRP secara umum, kategori LR-PRP dan LP-PRP jelas tidak memiliki kekhususan dalam kandungan sel darah putih.Karena mekanisme kekebalan dan pertahanan tubuh, sel darah putih sangat mempengaruhi biologi intrinsik penyakit jaringan kronis.Oleh karena itu, agen biologis PRP yang mengandung sel darah putih tertentu dapat secara signifikan meningkatkan regulasi kekebalan tubuh serta perbaikan dan regenerasi jaringan.Lebih khusus lagi, limfosit kaya akan PRP, yang memproduksi faktor pertumbuhan mirip insulin dan mendukung remodeling jaringan.
Monosit dan makrofag berperan penting dalam proses regulasi imun dan mekanisme perbaikan jaringan.Pentingnya neutrofil dalam PRP masih belum jelas.LP-PRP ditetapkan sebagai persiapan PRP pertama melalui evaluasi sistematis untuk mencapai hasil pengobatan OA sendi yang efektif.Namun, Lana dkk.Penggunaan LP-PRP dalam pengobatan OA lutut ditentang, yang menunjukkan bahwa sel darah putih spesifik memainkan peran penting dalam proses inflamasi sebelum regenerasi jaringan, karena mereka melepaskan molekul pro-inflamasi dan anti-inflamasi.Mereka menemukan bahwa kombinasi neutrofil dan trombosit teraktivasi memiliki lebih banyak efek positif dibandingkan efek negatif pada perbaikan jaringan.Mereka juga menunjukkan bahwa plastisitas monosit penting untuk fungsi non-inflamasi dan perbaikan dalam perbaikan jaringan.
Laporan skema persiapan PRP dalam penelitian klinis sangat tidak konsisten.Sebagian besar penelitian yang dipublikasikan belum mengusulkan metode persiapan PRP yang diperlukan agar skema tersebut dapat diulang.Tidak ada konsensus yang jelas mengenai indikasi pengobatan, sehingga sulit untuk membandingkan produk PRP dan hasil pengobatan terkait.Dalam sebagian besar kasus yang dilaporkan, terapi konsentrasi trombosit diklasifikasikan dalam istilah “PRP”, bahkan untuk indikasi klinis yang sama.Untuk beberapa bidang medis (seperti OA dan tendinosis), kemajuan telah dicapai dalam memahami perubahan persiapan PRP, rute pengiriman, fungsi trombosit dan komponen PRP lainnya yang mempengaruhi perbaikan jaringan dan regenerasi jaringan.Namun, penelitian lebih lanjut diperlukan untuk mencapai konsensus mengenai terminologi PRP terkait agen biologis PRP agar dapat mengobati patologi dan penyakit tertentu secara lengkap dan aman.
Status sistem klasifikasi PRP
Penggunaan bioterapi PRP autologus bermasalah karena heterogenitas sediaan PRP, penamaan yang tidak konsisten, dan buruknya standarisasi pedoman berbasis bukti (yaitu, ada banyak metode penyiapan untuk menghasilkan botol pengobatan klinis).Dapat diprediksi bahwa kandungan PRP absolut, kemurnian dan karakteristik biologis PRP dan produk terkait sangat bervariasi, dan mempengaruhi kemanjuran biologis dan hasil uji klinis.Pemilihan perangkat persiapan PRP memperkenalkan variabel kunci pertama.Dalam pengobatan regeneratif klinis, praktisi dapat menggunakan dua peralatan dan metode persiapan PRP yang berbeda.Suatu sediaan menggunakan pemisah sel darah standar, yang beroperasi pada darah lengkap yang dikumpulkan dengan sendirinya.Metode ini menggunakan teknologi pemisahan drum atau disk centrifuge aliran kontinu dan langkah centrifuge keras dan lunak.Sebagian besar perangkat ini digunakan dalam pembedahan.Cara lainnya adalah dengan menggunakan teknologi dan peralatan sentrifugal gravitasi.Sentrifugasi G-force tinggi digunakan untuk memisahkan lapisan kuning ESR dari unit darah yang mengandung trombosit dan sel darah putih.Perangkat konsentrasi ini lebih kecil dari pemisah sel darah dan dapat digunakan di samping tempat tidur.Perbedaan ģ – Gaya dan waktu sentrifugasi menyebabkan perbedaan yang signifikan dalam hasil, konsentrasi, kemurnian, viabilitas, dan keadaan teraktivasi dari trombosit yang diisolasi.Banyak jenis peralatan persiapan PRP komersial yang dapat digunakan dalam kategori terakhir, sehingga mengakibatkan perubahan lebih lanjut pada konten produk.
Kurangnya konsensus mengenai metode persiapan dan validasi PRP terus menyebabkan ketidakkonsistenan pengobatan PRP, dan terdapat perbedaan besar dalam persiapan PRP, kualitas sampel, dan hasil klinis.Peralatan PRP komersial yang ada telah diverifikasi dan didaftarkan sesuai dengan spesifikasi pabrikan, yang memecahkan berbagai variabel di antara peralatan PRP yang tersedia saat ini.
Memahami dosis trombosit in vitro dan in vivo
Efek terapeutik PRP dan konsentrat trombosit lainnya berasal dari pelepasan berbagai faktor yang terlibat dalam perbaikan dan regenerasi jaringan.Setelah aktivasi trombosit, trombosit akan membentuk trombus trombosit, yang berfungsi sebagai matriks ekstraseluler sementara untuk mendorong proliferasi dan diferensiasi sel.Oleh karena itu, wajar untuk berasumsi bahwa dosis trombosit yang lebih tinggi akan menyebabkan konsentrasi faktor bioaktif trombosit lokal yang lebih tinggi.Namun, korelasi antara dosis dan konsentrasi trombosit serta konsentrasi faktor pertumbuhan bioaktif trombosit yang dilepaskan dan obat mungkin tidak dapat dikontrol, karena terdapat perbedaan yang signifikan dalam jumlah trombosit awal antar pasien, dan terdapat perbedaan antara metode persiapan PRP.Demikian pula, beberapa faktor pertumbuhan trombosit yang terlibat dalam mekanisme perbaikan jaringan terdapat di bagian plasma PRP (misalnya, faktor pertumbuhan hati dan faktor pertumbuhan mirip insulin 1).Oleh karena itu, dosis trombosit yang lebih tinggi tidak akan mempengaruhi potensi perbaikan faktor pertumbuhan tersebut.
Penelitian PRP in vitro sangat populer karena berbagai parameter dalam penelitian ini dapat dikontrol secara akurat dan hasilnya dapat diperoleh dengan cepat.Beberapa penelitian menunjukkan bahwa sel merespons PRP dengan cara yang bergantung pada dosis.Nguyen dan Pham menunjukkan bahwa konsentrasi GF yang sangat tinggi belum tentu kondusif terhadap proses stimulasi sel, yang mungkin menjadi kontraproduktif.Beberapa penelitian in vitro menunjukkan bahwa konsentrasi PGF yang tinggi mungkin mempunyai efek buruk.Salah satu alasannya mungkin karena terbatasnya jumlah reseptor membran sel.Oleh karena itu, jika kadar PGF terlalu tinggi dibandingkan dengan reseptor yang tersedia, hal tersebut akan berdampak negatif pada fungsi sel.
Signifikansi data konsentrasi trombosit in vitro
Meskipun penelitian in vitro memiliki banyak kelebihan, namun juga memiliki beberapa kelemahan.In vitro, karena interaksi terus menerus antara banyak jenis sel yang berbeda dalam jaringan apa pun karena struktur jaringan dan jaringan seluler, sulit untuk mereplikasi in vitro dalam lingkungan kultur tunggal dua dimensi.Kepadatan sel yang dapat mempengaruhi jalur sinyal sel biasanya kurang dari 1% dari kondisi jaringan.Jaringan piringan kultur dua dimensi mencegah sel terkena matriks ekstraseluler (ECM).Selain itu, teknologi kultur yang khas akan menyebabkan akumulasi limbah sel dan konsumsi nutrisi secara terus menerus.Oleh karena itu, kultur in vitro berbeda dari kondisi mapan, suplai oksigen jaringan, atau pertukaran media kultur secara tiba-tiba, dan hasil yang bertentangan telah dipublikasikan, membandingkan efek klinis PRP dengan studi in vitro terhadap sel, jenis jaringan, dan trombosit tertentu. konsentrasi.Graziani dan lainnya.Ditemukan bahwa secara in vitro, efek terbesar pada proliferasi osteoblas dan fibroblas dicapai pada konsentrasi trombosit PRP 2,5 kali lebih tinggi dari nilai dasar.Sebaliknya, data klinis yang diberikan oleh Park dan rekannya menunjukkan bahwa setelah fusi tulang belakang, kadar trombosit PRP perlu ditingkatkan lebih dari 5 kali lipat dari nilai awal untuk mendapatkan hasil yang positif.Hasil kontradiktif serupa juga dilaporkan antara data proliferasi tendon in vitro dan hasil klinis.
（Isi artikel ini dicetak ulang, dan kami tidak memberikan jaminan tersurat maupun tersirat atas keakuratan, keandalan, atau kelengkapan konten yang terkandung dalam artikel ini, dan kami tidak bertanggung jawab atas pendapat artikel ini, harap dipahami.）
Waktu posting: 01-03-2023